细胞冻存液适用于冻存各种动物及人的细胞系和原代细胞。产品优势:
不含血清、无蛋白,减少病毒、霉菌和支原体等的污染;
化学成分明确,主要成分符合药典标准;
无批次差异,细胞复苏存活率高;
完全冻存液配方,可直接使用,方便简捷;
无需程序降温,可-80℃冰箱/液氮保存;
可原位冻存,比如杂交瘤细胞的亚克隆,可以减少工作量。
细胞冻存液冻存及复苏方式
冻存方式:
选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。
1、按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
2、按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。(参考:5×105至5×106 cells/ml)。
3、取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去离心管中的上清液。
4、加入适量无血清细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢混合均匀,制成细胞混合液。
5、将离心管中的细胞混合液分装于已标示的冷冻保存管中。
6、直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱,冷冻保存。
7、若研究者需要液氮保存时,可先放入-80℃冰箱过夜后,再移至-196℃液氮罐。
复苏方式:
1、从冰箱取出冻存细胞管,立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2、待冻存的细胞悬液完全融化后,立即加入1 ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合,再将细胞混合液从冻存管中移入含有9 ml该细胞培养基的试管中,混合均匀。
3、离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。
4、清洗细胞,充分洗净残留冻存液。
5、加入适量新鲜培养基,使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后,将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。
6、镜检后,研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。
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