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上海必锐栗拓工业仪表有限公司

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更新日期2023-03-03 15:20

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细胞价格

  一、细胞收到后操作流程

  1.收到细胞拿回实验室后,先打开外包装,用 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,放到显微镜下观察细胞状态。因运输问题,细胞会有不同程度影响,先不要打开培养瓶盖,放到培养箱静置 4 小时左右,以便稳定细胞状态。

  2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片作为后期售后依据)。

  建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。

  3.贴壁细胞:若细胞生长密度超过 80%时,根据情况传代,若细胞未超过 80%汇合度时,可将瓶装的*培养液移入废液缸中,原瓶(T25 瓶)保留 6-8ml *培养液继续培养,直至细胞密度超过 80%以后再进行传代。

  4.悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体转移至离心管,1000RPM 离心 5 分钟,弃去上清液,管底细胞沉淀加入 10ml *培养基吹打、重悬。放入新的细胞培养瓶/皿中培养过夜,根据细胞密度及生长情况分瓶传代。

  二、细胞常规培养步骤(请严格遵守无菌操作)

  1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 5mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 5 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入 6cm 皿中,加入约 6ml 培养基,培养过夜),第二天换液并检查细胞密度。

  2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

  1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

  1. 弃去培养瓶中上清液,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

  2. 加 1-2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加 6ml *培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落、吹散。

  http://www.xycells.com/SonList-814787.html

  https://www.hbzhan.com/st162535/erlist_814787.html


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