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杭州众芝康菇生物技术有限公司

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金华ZZKG-虫草多糖的提取

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金华ZZKG-虫草多糖的提取
(1)虫草多糖菌丝体预处置。取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处置,以除掉湿菌体中的脂类物质,一起使糖苷酶失掉活性,避免多糖的降解。
(2)用热水提取多糖。取上面经预处置的灵芝湿菌体,放人1:20的热水(95℃)中浸提,一次3小时,接连浸提3次,兼并3次的水浸提液减压、浓缩至必定体积,再用3倍体积的95%乙醇混合,静置10-12小时,再离心,最终参加75%的乙醇重复洗刷,以沉积多糖。众芝康菇虫草多糖此沉积物为粗多糖,其间稠浊有蛋白质、色素、低聚糖等小分子杂质,通常要经过纯化。
(3)多糖的纯化,去蛋白质和deae纤维素柱层析。去蛋白质通常选用sevag法:参加0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振动半小时进行别离,直至氯仿与水的界面无沉积停止,且要重复处置2-3次才干有用除掉多糖中的蛋白质。多糖纯化通常选用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖,别离以0.025mol/l、0.1mol/l的硼砂,0.1mol/l的氢氧化钠溶液进行洗脱,然后用0.2%恿铜硫酸液比色测定吸收度,搜集有多糖的洗脱液,再浓缩脱盐即得所需的多糖。
(4)虫草多糖纯度的判定。
可用电泳法进行判定,若是存在单一带,阐明为纯多糖
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